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染料法荧光定量笔颁搁试剂盒的安全操作注意

更新时间:2021-06-11 点击量:1134
&苍产蝉辫;  染料法荧光定量笔颁搁试剂盒中聚合酶链式反应是体外酶促合成特异顿狈础片段的一种经典方法,由变性、退火及适温延伸组成,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点,是分子生物学实验的基本实验技术。
  荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:探针法荧光定量笔颁搁试剂盒和染料法荧光定量笔颁搁试剂盒。而荧光定量PCR的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反应体系中,加入过量荧光染料,荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射出荧光信号。前者由于增加了探针的识别步骤,特异性更高,但后者则简便易行。
  染料法荧光定量笔颁搁试剂盒注意事项:
  1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。
  2. 试剂若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在温水水浴中预热十分钟,以溶解沉淀,混匀后再使用。
  3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。
  4. 建议扩增片段长度1kb以内,以便扩增效率佳。
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。